主要规格及技术指标

1. 全自动倒置显微镜系统 1.1 光学系统：无限远校正光学系统，标准齐焦距离45mm，光程短荧光损失少。 1.2 双层光路，机身闭环结构设计，高刚性和稳定性。 1.3 电动控制Z轴，最小Z轴步进精度10nm；电动光路切转与调节，可通过电容式触摸屏控制器、软件、手动三种方式控制功能，包括Z轴、物镜转盘、聚光镜、激发块转盘、电动DIC棱镜切换等。 1.4 电动激发块转盘≥8孔，无需拆卸更换激发块，内置电动光闸，防水设计；荧光激发块至少包含窄带带通紫外激发（UV），窄带带通蓝光激发（B）和宽带绿光激发（G）三种，并可同时安装不少于六个荧光激发块。 1.5 聚光镜：具有7孔位，数值孔径N.A.0.55，工作距离W.D.27mm电动七孔聚光镜；电动孔径光阑，电动偏光镜可自动旋入、旋出光路。 1.6 透射光源：长寿命高亮度LED冷光源。 1.7 高分辨率荧光成像及TIRF物镜： 10X干镜，数值孔径NA0.40，工作距离WD3.1mm； 20X干镜，数值孔径NA0.70，工作距离WD0.8-1.8mm带矫正环； 40X干镜，数值孔径NA.95，工作距离WD0.18mm带矫正环； 60X TIRF油镜，数值孔径NA1.49工作距离WD0.13mm； 100X TIRF油镜，数值孔径NA1.7，工作距离WD0.08mm；150X TIRF油镜，数值孔径NA1.45，工作距离WD0.08mm。 1.8 明场观察附件：全套微分干涉（DIC）附件； 1.9 超声电动载物台：XY移动 114mmX75mm，XY精度 0.1μm，重复精度 0.7μm，配有扫描台控制手柄，配套多孔板、35mm培养皿和切片适配器。 1.10 Z轴防漂移系统：使用低细胞光毒性的极弱红外激光监控，可在各种观察方式下自动对共聚焦小皿或玻片样品进行自动聚焦，硬件聚焦，非软件聚焦。 自动锁焦、连续实时锁定，锁定过程可以通过补偿调节功能进行微调锁焦操作。光路全部电动切入或退出。 1.11 活细胞培养系统：四层加热，温度设定精度0.1℃，带有物镜加温功能和温度反馈功能；带CO2气体流量；支持35mm培养皿等观察。 2. cell反射荧光光源、实时控制RTC系统 150W氙灯，光谱范围：各波长强度平稳，紫外及可见光范围内无明显峰值变化；快速光闸:开关时间 1ms，激发光强电动多级调节，调整级别 14级； 滤色片转轮、光源及光闸和显微镜之间采用光纤连接，无震动传导；配备光强反馈系统，实时监视光源强度变化，自动补偿激发光强度，保证长时间定量试验中光强的稳定。 可以操纵各硬件同步协调工作，具有独立于电脑的中央控制器，可以根据指令自行调整各硬件同步工作状态，无需等待电脑分配时序。具备至少3个模拟和4个数字外触发接口，可以快速调控外部设备，时间分辨率≤1ms, 精确度≤10ms；可以通过同步外触发装置控制自动加药和电生理系统等其他硬件同步工作。 3. 固体激光器：405nm 100mW、488nm 100mW、561nm 100mW、640nm 100mW，全部带有快速光闸和XY位置可调的视场光阑。 4. 自动TIRF光路系统（4通道） 4.1 每个都可以电动调节光纤入射角角度同时达到TIRFM的临界角，消逝波有效成像范围内，消逝波深度调节精度可以达到1nm； 4.2 每个激光器都配有独立的DM；每个激光器都配有独立的光纤，为不同的波长提供最适合的角度。 4.3 可以用于光漂白实验，从而实现FRAP和光活化等应用。 4.4 具有TIRFM100%、TIRF & widefield各50%和“100% widefield”输入光口，可以轻松导入宽场光源。 4.5 可以在5个维度（XYZ和α,β倾角）上进行光纤校准，校准调节方便；电动马达调节TIRF角度。 4.6 TIRFM实验拍摄图片以及激光控制等功能均通过实验管理界面控制实现。可以计算消逝波深度（软件计算）；通过鼠标滚轮或者键盘即可微调入射角度进行；自动编程TIRF命令完成复杂应用（如多色TIRF等） 5. 单光子探测器 5.1 具有EM增益功能，最大增益倍数为1000X，连续可调。 5.2 背照式EMCCD，量子效率 (QE) 峰值大于90%。 5.3 帧转移EMCCD，曝光和读出可同时进行，连续采集图像数据。 5.4 相机真空腔：全金属封装真空腔, 不使用环氧树脂密封。 5.5 512X512像素，像素尺寸16X16µm。 5.6 像素阱深：成像区域：180,000e-，增益寄存器： 800,000e-。 5.7 线性的、经校准的精确EM增益，即软件设定的增益即为实际物理增益。 5.8 读出频率：20MHz和10MHz（EM模式），5MHz和.625MHz（非EM模式）。 5.9 在512X512分辨率下，图像采集速度>= 67 帧/秒---417 帧/秒。 5.10 读出噪声：20 MHz EM端口<= 75e-；10 MHz EM端口：45e- . 5.11 暗电流：0.0015 e-/像素/秒。 5.12 在所有读出端口及读出频率下均为16位数字化。 5.13 背景杂信号：0.002 杂信号/像素（1000X EM增益下），开启背景杂信号去除功能时检测不到杂信号。 6 显微图像控制及分析软件 6.1 对图像中的直线显示线上灰度强度变化，从而反映图像中的变化特性；在图像上添加注释、箭头等功能，可以方便的表示图像中的重点关注部位； 6.2 调节亮度、对比度、伽玛值以及灰度显示范围，并可以单独调节RGB各通道的亮度，方便地对图像添加伪彩色、改变色彩模式以及色阶位数等功能，可以改变图像分辨率、旋转图像等各种操作，支持反转、低通、高通、锐化等滤镜，使图像关注点和各荧光通道获得最佳的显示效果； 6.3 对各通道图片做色彩合成，方便显示多染标本的图像；显示荧光在细胞上的定位图像；输入硬件信息即可实现添加标尺功能，从而显示图像的放大比例关系； 可实时对多幅视野相邻图像做大图拼接，实时获取高分辨率大视野图像； 6.4 可以做离线白平衡、市场平整度以及背景校正等处理，便于后期图像处理； 6.5 可实时对不同Z轴平面图像进行景深扩展，实时获取多层面的清晰图像；提供三种反卷积算法，包括近邻法、非近邻法、Wiener滤镜 6.6 可以提供报告模板，进行图文并茂的报告输出； 6.7 实验编辑功能（Experiment manager）可以控制周边硬件高速获取图像并进行同步的相关分析。可以进行多通道荧光自动获取，多维显微成像控制：X, Y, Z, T,等多维控制，实现多时间、多标荧光、Z序列的自动采集和处理； 6.8 高动态范围（HDR）图像采集：可以选择自动HDR或手动HDR，实现荧光强度高低差异的样品荧光均匀成像，保证充分获取到细节图像； 6.9 可以随意对图象切割、测量、计数、分类；HE等染色方法的阳性灰度、阳性比例计算、荧光强度分析等。可选择面积、周长、角度等50多种测量方式，所有的测量结果可以导出到EXCEL表格，以便进行后期的其他分析和存档等； 6.10 自动三维反卷积功能，可以实现数字共聚焦结果，计算方法包括3D CI反卷积算法, no neighbor, nearest neighbor, Winner filter等国际公认计算模式，每个模式均有适合于共聚焦图像和非共聚焦图像的专业算法。 6.11 可以控制电动载物台进行切片和多孔板等全区域扫描，并提供整体图像相对位置的参照；可以自动进行大标本的高分辨率全视野图像采集；可以自定义多孔板上的不同位置进行自动多点扫描; 6.12 Ratio分析功能可实现在线及离线的图像间比值分析。

主要功能及特色

全内反射荧光显微镜（total internal reflection fluorescent microscope，TIRFM），利用光线全反射后在介质另一面产生衰逝波的特性，激发荧光分子以观察荧光标定样品的极薄区域，观测的动态范围通常在200nm以下。因为激发光呈指数衰减的特性，只有极靠近全反射面的样本区域会产生荧光反射，大大降低了背景光噪声干扰观测标的，故此项技术广泛应用于细胞表面物质的动态观察。 本设备主要用于细胞膜上单个蛋白质动力学研究、钙离子探测、药物跟踪和细胞结构成像、表面分子浓度梯度变化、表面分子的旋转、荧光寿命及反应速率的测量，适用于细胞膜分析或单分子结构分析；TIRF能够确保生成高质量的活细胞图像提高科学研究结果。

主要附件与配置

防震台、工作站