南开大学
激光扫描共聚焦显微镜
联系人:
欧阳砥
邮箱:
phdoydnk@nankai.edu.cn
电话:
13920074369
生产厂家:
奥林帕斯
型号:
FV3000RS
购置日期:
2017-10-01
主要规格及技术指标
1. 7条固体激光器照射系统 1.1 紫色固体激光器:405nm,功率50mW;蓝色固体激光器:488nm,功率20mW;绿色固体激光器:561nm,功率20mW;红色固体激光器:640nm,功率20mW;蓝紫色固体激光器:445nm,功率75mW;蓝绿色固体激光器:514nm,功率40mW;橙色固体激光器:594nm,功率20mW。 1.2 开放式和一体化的激光耦合器,通过单独一根宽光谱、高透过率光纤导出,近紫外到红光区域一体化色差校正,无须调节光纤中心。 1.3 所有激光谱线均由AOTF控制,可实现连续调节激光强度、高速激光谱线切换,具有快速光闸控制功能,可进行局部的ROI成像、FRAP等实验应用;激光强度调节范围:0.01%-100%,调节步进精度0.1%。1.10 *具有激光强度回馈电路,实时监视激发激光的强度变化,动态调节激光,适合长时间Timelapse实验对激光输出的要求,维持激光输出稳定性,保证重复实验可比性与结果可重复性。 2. 共聚焦扫描检测系统 2.1 扫描系统和检测系统一体化集成设计,扫描检测系统与显微镜直接耦合,非光纤式导出,避免荧光信号的损失。 2.2 四个独立的荧光检测器和荧光检测通道,一个透射DIC检测通道,所有通道可实时扫描、同时叠加。 2.3 四个大靶面制冷型GaAsP超高灵敏检测器,可用于弱荧光成像,或活细胞低激光高信噪比成像;检测器要求:QE45%@500-550nm,增益800,000,暗电流100e/s。 2.4 透射型光栅分光系统,所有荧光检测通道可执行高精度高线性光谱扫描、光谱检测和光谱拆分功能。 2.5 光谱最小调节步进:1nm,确保全光谱一致的分辨率,并且连续可调。 2.6 XY独立双扫描振镜,均为高反射率的抗氧化银镀膜;共两套扫描振镜,其中一套为常规扫描振镜,另一套高速共振扫描振镜。 2.7 旋转角度:0°-360°自由旋转,步进0.1°,旋转扫描时可同时进行DIC扫描观察。 2.8 光学放大扫描:1X-50X光学放大,步进0.01X。 2.9 扫描速度:常规扫描振镜 512X512=16帧/秒,256X256=62帧/秒;共振扫描振镜 512X512=30帧/秒(全视野,无Zoom),512X32=438帧/秒。 2.10 扫描模式:点扫描,矩形扫描,任意线/面扫描,任意图形区域扫描,Clip扫描,Zoom In 扫描,任意角度扫描,及X,Y,Z,T,λ任意结合或同时组合。 2.11 共聚焦针孔:全自动连续调节型,50-800μm,步进1μm。 3.超高分辨率成像系统: 可使用所有激光器波段;4个同步超高分辨率通道;分辨率≤120nm;所有适合激光器激发的荧光样品都可以进行超高分辨率成像;无需选择特定的荧光染料;超高分辨率成像为线性成像,可以用作定量分析:如荧光强度分析、FRAP、FRET分析等。 4.全自动倒置显微镜系统: 4.1 光学系统:无限远校正光学系统,标准齐焦距离45mm,光程短荧光损失少。 4.2 双层光路,后部连接共聚焦扫描检测系统,预留显微镜两侧空间用于功能扩展,机身闭环结构设计,高刚性和稳定性。 4.3 电动控制Z轴,最小Z轴步进精度10nm;电动光路切转与调节,可通过电容式触摸屏控制器、软件、手动三种方式控制功能,包括Z轴、物镜转盘、聚光镜、激发块转盘、电动DIC棱镜切换等。 4.4 电动激发块转盘8孔,无需拆卸更换激发块,内置电动光闸,防水设计;荧光激发块至少包含窄带带通紫外激发(UV),窄带带通蓝光激发(B)和宽带绿光激发(G)三种,并可同时安装不少于六个荧光激发块 4.5 电动长工作距离万能聚光镜:具有7孔位,数值孔径N.A. 0.55,工作距离W.D. 27 mm电动七孔聚光镜;电动孔径光阑,电动偏光镜可自动旋入、旋出光路。 4.6 荧光光源:130W 超高压汞灯,使用寿命≥2000小时,光纤接入,减少对标本的热损伤,7档光强调节,带计数归零开关。 4.7 透射光源:长寿命高亮度LED冷光源。 4.8 明场观察附件:全套微分干涉(DIC)附件。 4.9 高分辨率共聚焦显微镜系列物镜:10X干镜,数值孔径NA≥0.40,工作距离WD 3.1mm;20X干镜,数值孔径NA 0.70,工作距离WD 0.8-1.8mm带矫正环;30X深层成像硅油物镜,数值孔径NA 1.05,工作距离WD 0.8mm;40X干镜,数值孔径NA 0.95,工作距离WD 0.18mm带矫正环;40X油镜,数值孔径NA 1.30工作距离WD 0.2mm;60X油镜,数值孔径NA 1.42,工作距离WD 0.15mm;100X油镜,数值孔径NA 1.70,工作距离WD 0.08mm 4.10 电动载物台,XY移动范围 114mmX75mm,XY精度 0.1μm,重复精度 0.7μm,同时配有扫描台控制手柄,配套种专用样品夹适配器。 4.11 Z轴防漂移系统:使用低细胞光毒性的极弱红外激光监控,可在各种观察方式下自动对共聚焦小皿或玻片样品进行聚焦,硬件聚焦,非软件聚焦; 自动锁焦、连续实时锁定,锁定过程可以通过补偿调节功能进行微调锁焦操作,光路全部电动切入或退出。 4.12 活细胞培养系统:四层加热,温度设定精度0.1℃,带有物镜加温功能和温度反馈功能;带CO2气体流量;支持35mm培养皿等观察。 5. 计算机工作站:CPU Intel Xeon E5-1620v或更高;内存 16GB;硬盘 1TB HDD x2;SSD固态硬盘 256GB;显卡NVIDIA Quadro K620 2GB或更高;DVD writer;操作系统Windows 7 Professional 64bit;30英寸液晶显示屏。 6. 分析软件: 6.1 智能化设置:根据染料或不同应用要求,软件可一键设置自动配置整个光路; 6.2 多维显微成像控制:X,Y,Z,T等控制,实现多时间、多通道荧光、Z序列的自动采集和处理; 6.3 三维/四维可视图象重建,具有不少于Alphablend,Isosurface,MIP等多种三维渲染模式,随意进行空间切割,交互立体显示,并在成像过程中实时三维重构; 6.4 精准的时序管理器和实时采集模块,可轻松设计复杂流程实验,如多维、长时程、多通道、光刺激等,全自动实验流程的设计和实现,不同成像任务之间按编辑逻辑以毫秒精度进行快速切换,以保证数据完整性。 6.5 Z轴深度补偿功能,随成像深度不同,可以随意线性或非线性调节激光强度和检测器灵敏度,自动补偿由于样品深度增加造成的信号衰减。 6.6 控制电动载物台进行切片和多孔板等全区域扫描,并提供整体图像相对位置的参照;可以进行自动多点位采集,大标本的高分辨率全视野图像采集,具备自动对焦地形图功能,确保每个视野下获得最佳聚焦状态。 6.7 多孔板自动导航功能,适用于6孔板、12孔板、24孔板、96孔板等或者用户自定义孔数的数据采集工作。用户可以定义一个孔内的位置采集模式应用到其它孔位,可进行预定义的全孔拼图、单独位置采集或者ROI拼图,并可对所选位置进行分组。 6.8 可控制和触发其他外部设备同步工作; 6.9 荧光强度测量,区域和周长等参量计算; 6.11 共定位定量分析:对于多标荧光图像进行共定位定量分析; 6.12 离子浓度图像:实时追踪荧光强度变化,获取离子浓度比例(Ratio)图像; 6.13 荧光漂白后恢复(FRAP):提供AOTF对特异性生物大分子进行定点漂白实验; 6.14 检测特异荧光标本指纹光谱:分离发射光谱重叠的多重标记荧光标本,可在扫图过程中实时进行光谱拆分,具有盲式分离法、荧光染料分离法、光谱图像分离法等多种光谱拆分模式; 6.15 可根据不同用户自定义个性化的布局界面。
主要功能及特色
激光扫描共聚焦显微镜(Confocal laser scanning microscope,CLSM)是近代最先进的细胞生物医学分析仪器之一。它是在荧光显微镜成像的基础上加装激光扫描装置,使用紫外光或可见光激光荧光探针,利用计算机进行图像处理,不仅可观察固定的细胞、组织切片,还可对活细胞的结构、分子、离子进行实时动态地观察和检测。 主要用于组织切片、生物材料荧光标记、活细胞荧光标记的高分辨率成像,并且可以得到清晰锐利的多层Z平面结构,即光学切片,并以此可以构建标本的三维实体结构,用作形态分析和三维空间测量。用于活细胞生物分子、细胞器或离子等生物物质的定性、定量、定时和定位分布检测等,可监测细胞内钠镁钙离子浓度变化,捕捉钙火花,并且缩短实验时间,降低光毒性。用于获取图像的时间信息,研究荧光标本随时间浓度、强度、扩散速度、空间移动等变化的数据信息,进行相关动力学研究。可对样本进行光谱扫描,获取荧光标本光谱信息,研究荧光材料光谱特性、获取未知染料发射光谱图。超分辨清晰的影像结果能够进一步反映出实验数据的真实性和可靠性。
主要附件与配置
防震台、工作站、稳压电源